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上海沪震实业有限公司
GD 基本培养基
是一种能够自动诱导由乳糖操纵子调控的目的蛋白质表达的培养基。该培养基有利于大肠杆菌的高水平生长,且无需监测细胞生长状态、无需加入诱导物(如IPTG)即可高水平自动诱导表达目的蛋白。现货供应。咨询!
GD 基本培养基特殊培养法
二倍体细胞培养法与一般培养相同,关键在于传代,其传代程序为:
1.吸除旧培养液注入另瓶中。
2.用温BSS冲洗1次。
3.用0.25%温*消化,加入消化液量以仅覆盖细胞层即可;作用1~5分钟。
4.待细胞附着松动、细胞质边缘卷起和间隔加大,便终止消化。为防止细胞丢失,可不必再用BSS冲洗,直接向瓶中加入培养液(新旧培养液按2:1新旧混合)。
5.轻轻反复吹打制成单个细胞悬液。
6.按一分为二比例接种培养。
使用饲细胞(Feeder Cells)。制备方法:
1.取原代培养的人或动物胚胎成纤维细胞,90%汇合时制成细胞悬液,再按105细胞/毫升重新接种培养。
2.在细胞半汇合时,准备0.25μg/ml的丝裂霉素C,按2μg/106细胞的量加入到培养瓶中过夜;或用射线单次照射,剂量30~50戈瑞。
3.细胞经上述处理后,Hanks液漂洗两次、更换培养液、再培养24小时,*消化细胞制成悬液,按5×104(104细胞/cm2)接种入新GD 基本培养基中。
4.48小时后,即可用于细胞克隆之用。
GD 基本培养基细胞分离(克隆)培养
多孔塑料培养板单细胞克隆法:
1.消化:取健康待克隆细胞,吸出瓶内培养液,加消化液。
2.低密度细胞悬液的制备:做克隆细胞时首先需先用消化法制备出分散成单个细胞悬液,然后稀释细胞,使之成为1~2细胞/毫升悬液,zui适宜细胞密度为1~2细胞/ml培养液。
3.接种:先用吸管轻轻吹打细胞悬液,使混悬均匀,继用加样器向塑料培养板每孔内加0.5毫升。接种时要迅速准确,争取在zui短时间内加完,以免培养液蒸发,然后迅速盖好盖板,置CO2温箱培养。
4.标记:培养6~12小时后,待细胞下沉冰贴附于培养板孔底后,从温箱中取出,置倒置光显微镜台上,观察和标记下含有单个细胞的孔,置CO2温箱培养。在培养中一般无需换液,只有在细胞增长过于缓慢时才可进行换液。换液时先吸除旧培养基,但不要吸除过多,余少许,以免细胞干涸。然后再迅速补加新鲜克隆培养液,继续培养3~4周。待孔内细胞增至500~600个时,可进行分离培养。
5.分离扩大培养:培养86~96小时后进行观察。挑选生长良好的单细胞克隆孔,先吸除旧培养液,用Hanks洗1~2次,继加*少许,加入量已能覆盖细胞群即可,如过多,应吸除多余消化液。置于倒置显微镜下窥视,待发现细胞变圆时,加入0.1ml含10%血清的克隆培养基,用吸管轻轻吹打,当细胞离开底物悬浮后,一并吸入管内,移入另瓶或皿中,再补加一定量克隆培养液,置CO2温箱中继续培养、增殖,使之形成新的细胞群后,即转用常规培养法培养。
GD 基本培养基相关产品如下:hz1345 MEM 250g 含L-*,不含*
hz1346 MEM 250g 含Earle's盐、L-*和非必需氨基酸,不含*
hz1347 MEM 250g 含Hanks'盐、L-*和非必需氨基酸,不含*
hz1348 MEM(可高压灭菌) 250g 含Earle's盐,不含L-*和*
hz1349 MEM(可高压灭菌) 250g 不含L-*和*
hz1350 MEM 250g 含Earle's盐和L-*,不含L-*、L-赖氨酸、L-蛋氨酸和*
hz1351 MEM 250g 含Earle's盐和L-*,不含磷酸钠和*
hz1352 MEM(Hyb)(可高压灭菌) 250g 含Hanks’盐,不含L-谷胺酰胺和*
hz1353 Ham F10 250g 含L-*,不含*
hz1354 Ham F12 250g 含L-*,不含*
hz1355 RPMI 1640 250g 含L-*,不含*
hz1356 RPMI 1640 250g 含L-*,不含*和酚红
hz1357 RPMI 1640 250g 含L-* 不含*和磷酸钠
hz1358 RPMI 1640 250g 含L-*和25mM HEPES不含*
化妆品检测培养基
hz1361 SCDLP液体培养基 250g 用于化妆品样品制备、前增菌培养(GB标准)
Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth
hz1362 *吐温80营养琼脂 250g 用于化妆品细菌总数测定(GB标准)
Lecithin Tween 80 Nutrient Agar
hz1363 乙酰胺琼脂 250g 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准)
Acetamide Agar
hz1364 十六烷*基*琼脂 250g 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准)
Cetrimide Agar
hz1119 *发酵培养基 250g 生化试验培养基,用于细菌(如*)*发酵试验(GB标准)
Mannitol Medium
hz1366 明胶培养基基础 250g 生化试验培养基,用于细菌明胶液化试验(GB标准)
Gelatin Medium Base
hz1367 绿脓菌素测定培养基 250g 用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准)
King Medium A
hz1038 乳糖胆盐培养基 250g 用于化妆品中粪大肠菌群的测定(GB标准)
Lactose Bile Medium
药品、生物制品检测培养基
hz1017 液体硫乙醇酸盐培养基 250g 用于药品,生物制品无菌试验,培养需、厌氧菌
Fluid Thioglycollate Medium
hz1380 真菌培养基 250g 用于药品,生物制品霉菌无菌试验
Fungi Medium
hz1381 酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基/YPD琼脂 250g 用于测定酵母菌总数
Yeast Peptone Dextrose Agar
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