牛附红细胞体（牛嗜血支原体）LAMP试剂盒 返回列表页

操作步骤：
1：样品准备：取1毫升细胞培养上清（贴壁和悬浮细胞都可以 已培养48小时以上），在16000g离心5分钟，小心弃去上清，避免丢失沉淀（沉淀量有可能很少，目视看不到）。将沉淀用无菌PBS重悬，在16000g离心5分钟，同样小心弃去上清，如此反复用无菌PBS洗三次 将获得的沉淀用100微升超纯水重悬，置于100℃水浴中孵育5分钟。如此制备好的样品可在4℃保存1到2个月。
2：PCR反应的准备：
待各组份融化后先瞬时离心，然后轻弹混匀。按下表在已灭菌的PCR管中配制反应体系，每次实验需加一个阴性和一个阳性对照，测试反应管可以有多个。配制过程中应注意无菌，并注意避免操作产生的气溶胶造成样品间的交叉污染，推荐在有风压的设备如超净台或生物安全柜中进行操作。建议配制完毕后瞬时离心以使液体沉至管底。

服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增鲍疱疹样病毒，与其他植物没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
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使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

1g酿酒酵母Human ORAI2 ELISA Kit

5g链格孢Human OSGIN1 ELISA Kit

25g黄硬皮马勃Human ORAI3 ELISA Kit

5g毛柄金钱菌(金针菇)Human ORC5L ELISA Kit

5g狂犬病参考疫苗Human ORC4L ELISA Kit

5MG巨型艾美耳球虫Human OSR1 ELISA Kit

100g中国台湾根霉Human ORC6 ELISA Kit

25g黄赭色链霉菌Human OS9 ELISA Kit

1g鸭疫里氏杆菌Human OLFM3 ELISA Kit

250mg胶孢Human OSBP ELISA Kit

5g枯草芽孢杆菌Human OLIG2(Oligodendrocyte transcription factor 2) ELISA Kit

1g耐辐射薄层菌Human OMCG1 ELISA Kit

5g多根硬皮马勃Human OMA1 ELISA Kit

1g镰孢霉Human ONECUT2 ELISA Kit

250mgChryseobacterium lathyriHuman ONECUT1 ELISA Kit

5g红球菌Human OPA3 ELISA Kit

1g高山被孢霉Human OPTN ELISA Kit

牛附红细胞体（牛嗜血支原体）LAMP试剂盒Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)  磷酸化血小板源性生长因子受体-B抗体紫云英苷苄基双(三苯基膦)氯化钯(Ⅱ)Human EDN (EDNEosinophil-Derived Neurotoxin) ELISA Kit

PDI  蛋白质二硫键异构酶抗体对叶百部碱苄基双(三苯基膦)氯化钯(Ⅱ)Human TTR (Transthyretin) ELISA Kit

PDK1/PDPK1  3磷酸肌依赖性蛋白激酶1抗体仙茅苷3-磺基十六烷基二甲甜菜碱Human TCF20 (Transcription Factor 20) ELISA Kit

Phospho-PDK1 (Ser241)  磷酸化3磷酸肌依赖性蛋白激酶1(R型)人参皂苷Rh23-磺基十六烷基二甲甜菜碱Human GAPDH (Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase) ELISA kit

Phospho-PDK1 (Tyr373/376)  磷酸化3磷酸肌依赖性蛋白激酶1抗体白花前胡甲素Chloro[(S)-(-)-2,2'-bis(di-p-tolylphosphino)-1,1'-binaphthyl](p-cymene)ruthenium(II) chloride,[RuCl(p-cymene)((S)-tolbinap)]ClHuman TFR/CD71 (Transferrin Receptor) ELISA Kit

Pdk4  酮酸脱氢酶激酶4抗体白花前胡素(S)-(-)-1-BOC-2-吡咯烷甲Human TFR2 (Transferrin Receptor 2) ELISA Kit  

PDX1  胰十二指肠同源异型盒基因抗体贝母辛(S)-(-)-1-BOC-2-吡咯烷甲Human F-TESTO (Free Testosterone) ELISA Kit  

PEA3  瘤促活化因子3抗体地奥司明(R)-(+)-1-Boc-2-吡咯烷甲Human TF (Transfer Factor) ELISA Kit