基孔肯雅热PCR检测试剂盒 返回列表页

美国NovaBios基孔肯雅热PCR检测试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

本公司专业供应各种进口品牌基孔肯雅热检测试剂盒，包括美国的NovaBios、德国NOVA、广州创仑等CDC品牌。主要包括胶体金、酶免、PCR等方法学。欢迎咨询

基孔肯雅热IgM诊断试剂

基孔肯雅热IgG诊断试剂

基孔肯雅热ELISA检测试剂

基孔肯雅热快速检测试剂

基孔肯雅病毒核酸检测试剂盒（荧光探针PCR）

美国CDC的基孔肯雅病毒诊断试剂——美国的NovaBios

德国CDC使用的基孔肯雅病毒诊断试剂——德国NOVA

美国NovaBios基孔肯雅热PCR检测试剂盒

【预期用途】 
基孔肯雅IgG/IgM抗体ELISA检测试剂盒主要用于定性检测人血清和血浆中抗基孔肯雅病毒的IgG/IgM抗体。 
【实验原理】 
此试剂盒基于ELISA技术。包被板中包被了抗人IgG抗体，如果人血清或血浆中含有IgG时，则会与其特异性结合，洗板将未结合的物质洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未结合的物质，然后加入链霉亲和素和基孔肯雅抗体酶联物。洗板后，加入TMB底物液，颜色变成蓝色，加入终止液终止反应，颜色由蓝色转为黄色，zui后用酶标仪在450nm处读数。 
【试剂组成】 
包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgG抗体，密封在可重封铝箔袋中 
基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白盖 
基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗体，即用，蓝色，白盖 
基孔肯雅IgM阳性质控：1瓶，1.5mL，黄色，即用，红盖 
基孔肯雅IgM临界质控：1瓶， 2mL，黄色，即用，绿盖 
基孔肯雅IgM阴性质控：1瓶，1.5mL，黄色，即用，蓝盖 
样本稀释液： 1瓶包含100mL的即用缓冲液，用于稀释样本，pH7.2±0.2，黄色，白盖 
洗涤液：1瓶，包含50mL  20倍浓缩的缓冲液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白盖 
链霉亲和素结合液：1瓶包含6mL过氧化物酶结合的链霉亲和素，即用，红色，黑盖 
TMB底物液：1瓶包含15mL  TMB，即用，黄盖 
终止液：1瓶包含15mL，即用，内含硫酸，0.2mol/l，红盖 
【需要的设备和材料】              
固定板
封板片 
酶标仪（450/620nm）              
37℃孵箱 
洗瓶或自动洗板机
10~1000μL的移液器
漩涡混匀器 
蒸馏水或去离子水
一次性试管
计时器 
【储存和稳定性】 
试剂在有效期内，储存于2-8℃稳定 
【试剂准备】 
洗涤液的准备 
用双蒸水稀释洗涤液，例子：10ml洗涤液+190ml双蒸水。稀释好的洗涤液在室温下5天内有效。 
【样本的采集和准备】 
这个实验中使用的样本是人血清和血浆，如果实验在样本采集后的5天内进行，则需要储存在2-8℃，否则，必须于-20℃到-70℃深度冻存。如果样本是深度冻存的，在使用前，则需要充分混匀，避免反复冻融。 不推荐使用热灭活的样本 
【样本的稀释】 
将10μL样本跟1ml的样本稀释液混匀，并用漩涡混匀器充分混匀。
【实验步骤】 
在开始试验前，请仔细阅读试验说明。结果的可信度是依赖于严格地按照实验说明来进行的，铺板时zui少留1个孔为空白对照（A1）1个阴性质控孔（B1）2个临界质控孔（C1+D1）1个阳性质控孔（E1）。开始试验前，请将所有试剂都平衡到室温 
1.  吸取50μL的质控品和稀释过的样本到相应的孔中，留A1孔做空白对照孔
2.  封板 
3.  在37±1℃下孵育1小时±5分钟 
4.  当孵育完成时，揭去封板片，弃去反应液，每孔300μL洗涤液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的时间都必须＞5秒，zui后拍板将残留的液滴都拍去。 
5.  吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白对照孔的每个孔中，盖板 
6.  在室温孵育30分钟 
7.  重复步骤4 
8.  将基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素结合物混匀10分钟 
9.  吸取50μL基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素的复合物到除了空白对照孔的每个孔中，盖板。 
10.  室温孵育30分钟
11.  重复步骤4 
12.  吸取100μL的TMB底物液到每个孔中 
13.  避光孵育15分钟（精确） 
14.  加入100μL终止液到每个孔中，与加TMB底物液时的间隔和顺序都必须一样 
15.  用酶标仪在加入终止液后30分钟内与450/620nm处检测 
【检测】 
调整酶标仪，以空白对照孔调零，以450nm处检测所有孔的吸光度值。 
【结果】 
1.  检测生效的条件 
只有以下条件符合，检测的结果才能认为的有效的  
空白对照孔    吸光度值＜0.100  
阴性质控孔    吸光度值＜临界质控  
临界质控孔    吸光度值0.150-1.300  
阳性质控孔    吸光度值＞临界质控 
如果以上条件不符合的，那么试验结果则是无效的，需要重新检测
2.  结果的计算 
临界质控平均吸光度值的计算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37                                   
（0.39+0.37）/2=0.38    
平均吸光度值为0.38 
3.  结果的说明 
样本如果是比临界值高出10%，则认定为阳性， 
样本如果是在临界值上下10%之内，则认定为灰色区（推荐在2-4周之后再次检测新鲜的样本，如果样本仍然是灰色区，可以直接认为是阴性） 
样本如果是比临界值低出10%，则认定为阴性 
4.  结果的单位 
病人样本平均吸光度值×10 = U   
临界值 
例子： 1.216×10 =32U 
0.38 
临界值： 10 U 
灰色区：9-11 U 
阴性： ＜9 U 
阳性： ＞11 U

美国NovaBios

三、检测方法基孔肯雅热
常用检测方法主要有3种：血清学检测、核酸检测和病毒分离。一般情况下，病毒分离与核酸检测宜采用发病后1周内的血清；IgM抗体检测宜采用发病4天后的血清，IgG抗体的检测宜采用发病1周后的血清。基孔肯雅热
（一）血清学检测方法。基孔肯雅热
1．特异性IgM检测。基孔肯雅热
采用的方法有：捕获ELISA法（MacELISA）、间接ELISA法、免疫荧光法和免疫层析法等。基孔肯雅热
2．特异性IgG检测。基孔肯雅热
采用的方法有：间接ELISA法、免疫荧光法和免疫层析法等。基孔肯雅热
3．意义基孔肯雅热
（1）IgM阳性结果，表明患者新近CHIKV感染，用于基孔肯雅热早期诊断。基孔肯雅热
（2）IgG阳性结果，表明曾受到CHIKV感染；恢复期血清抗体滴度比急性期抗体滴度有4倍或4倍以上升高则可确诊。基孔肯雅热
（二）病原学检测方法。基孔肯雅热
1．基孔肯雅病毒核酸检测。基孔肯雅热
一般发病后7日内在多数患者的血清中可检测到病毒核酸。冻存伊蚊标本也可进行基孔肯雅病毒核酸检测。可采用RT-PCR和Real-time基孔肯雅热RT-PCR等核酸扩增的方法检测。
基孔肯雅热
2.基孔肯雅热病毒分离鉴定。基孔肯雅热
常用Vero、C6/36等敏感细胞系开展病毒分离，分离物可以免疫荧光法或核酸检测进行鉴定。基孔肯雅热
3．意义。基孔肯雅热
患者血清中分离到基孔肯雅热病毒和/或检测到病毒核酸后，可确诊基孔肯雅热病毒感染。
基孔肯雅热流行病学调查方案基孔肯雅热
为指导疾病预防控制专业人员做好基孔肯雅热疫情的流行病学调查工作，制定本方案。基孔肯雅热

美国NovaBios

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

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Third, the detection method Chikungunya heat
There are three commonly used detection methods: serological detection, nucleic acid detection and virus isolation. Under normal circumstances, the virus separation and nucleic acid detection should be used within 1 week after the onset of serum; IgM antibody detection should be used after 4 days of serum, IgG antibody detection should be used after 1 week of serum. Chikungunya heat
(A) serological detection methods. Chikungunya heat
1. Specific IgM detection. Chikungunya heat
Methods: Capture ELISA (MacELISA), indirect ELISA, immunofluorescence and immunochromatography. Chikungunya heat
2. Specific IgG detection. Chikungunya heat
The methods used include indirect ELISA, immunofluorescence and immunochromatography. Chikungunya heat
3. Meaning Chikungunya heat
(1) IgM positive results, indicating that patients with recent CHIKV infection, for the early diagnosis of chikungunya fever. Chikungunya heat
(2) IgG positive results, indicating that had been CHIKV infection; convalescence serum antibody titer than the acute phase antibody titer 4 times or 4 times higher than can be confirmed. Chikungunya heat
(B) pathogen detection methods. Chikungunya heat
1. Chikungunya virus nucleic acid detection. Chikungunya heat
Viruses are detected in sera from most patients within 7 days of onset. The Aedes aegypti specimens can also be tested for Chikungunya virus nucleic acid. Can be detected by RT-PCR and Real-time Chikungunya RT-PCR and other nucleic acid amplification methods.
Chikungunya heat
Isolation and identification of Chikungunya fever virus. Chikungunya heat
Commonly used Vero, C6 / 36 and other sensitive cell lines to carry out virus isolation, isolates can be immunofluorescence or nucleic acid detection for identification. Chikungunya heat
3. significance. Chikungunya heat
Coronary heart disease can be diagnosed after isolating Chikungunya virus and / or detecting viral nucleic acids in the patient's serum.
Chikungunya fever epidemiological investigation program
To guide the disease prevention and control professionals to do the epidemiological investigation of the Chikungunya fever epidemic, the development of the program. Chikungunya heat