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大鼠基质细胞衍生因子1βELISA试剂盒操作步骤

阅读:426发布时间:2014-7-4

大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒    Rat Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA Kit    ,规格:96T/48T,产品别名:    大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)检测试剂盒 
大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒原理的简要说明书:基质细胞衍生因子-1(SDF-1)又称趋化因子CXCL12,是小分子的细胞因子,属于趋化因子蛋白家族。它有两种形式, SDF-1α/CXCL12a和SDF-1β/CXCL12b。趋化因子有四个保守的半*残基形成两对双硫键以构成趋化因子的特殊结构。*第二半*残基之间隔着一个介入氨基酸残基。            
大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒操作步骤
1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9.在450nm波长处测定各孔的OD值。

 


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