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Lewis细胞培养(小鼠肺癌细胞)

时间:2024/4/11阅读:127
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细胞:Lewis细胞

中文名称:小鼠肺癌细胞

生长特性:贴壁

培养基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

收到细胞后请尽快更换配套培养基,或自己配置的新鲜培养基(含15%血清),如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)。

Lewis细胞传代:

1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。

2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时;

(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)

直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。

3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

 

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)

从临床脂肪抽吸术丢弃脂肪组织中分离获取脂肪干细胞,体外培养至第2代,流式细胞仪检测免疫分子HLAI、HLAII的表达。

(人NCI-H69细胞 肺癌细胞)(人NCI-H716细胞 结直肠腺癌细胞)

1×105个/孔ADSC细胞刺激异体淋巴细胞,观察细胞增殖情况。结果脂肪干细胞表达HLAI类分子,但未检测到HLAII类分子阳性表达。

(人NCI-H929细胞 白血病细胞)(人OV-1063细胞 卵巢上皮细胞癌细胞)

人IFN-γ刺激48h后,HLAI表达未见明显增高,HLAII类分子表达明显增高。异体或经IFN-γ作用的脂肪干细胞均未能刺激淋巴细胞体外增殖。

(人OVCAR-3细胞 卵巢腺癌细胞)(人143TK细胞 胸腺激酶缺陷型细胞)

脂肪干细胞可明显抑制PHA刺激的淋巴细胞增殖,IL-2可逆转脂肪干细胞的抑制作用。脂肪干细胞可明显抑制双相混合淋巴细胞反应,抑制作用呈脂肪干细胞细胞数量依赖性;经IFN—γ作用后抑制作用未见明显减弱。

(小鼠B16-F1细胞 黑色素瘤细胞)(人CA46细胞 淋巴瘤细胞)

结论ADSC可在体外抑制淋巴细胞增殖反应,具有一定的调节淋巴细胞反应的能力,有可能成为组织工程或细胞治疗中同种异体细胞来源。 



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