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CCD-841CoN细胞培养(人正常结肠组织细胞)

时间:2024/4/8阅读:64
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细胞:CCD-841CoN细胞

中文名称:人正常结肠组织细胞

生长特性:贴壁

培养基:MEM+1%NEAA+10%FBS(GIBCO胎牛血清)

冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO

收到细胞后请尽快更换配套培养基,或自己配置的新鲜培养基(含15%血清),如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时)。

CCD-841CoN细胞传代:

1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。

2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时;

(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)

直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。

3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。

4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。

 

(网络信息主针对网络推广作用,仅供参考,细胞培养请咨询细胞库管理员,以细胞库管理员提供给您的信息为准,操作前,如果有不明白之处,先咨询细胞库管理员,避免不必要的损失;)

牛结核杆菌(BTB)核酸检测:

结果分析判定

反应结束后保存检测数据文件。根据分析后图像调节baseline的start值(3-8),stop值(13-18)以及Threshold值,使Std curve 窗口下的标准曲线达到最佳(correlation数值介于-0.97~-1之间,correlation数值等同于∣r∣值),最后到Reporter窗口下记录仪器自动分析计算出的未知标本数值(Qty-Copies/ml)。

质控标准:

阴性质控品:全部阴性

BTB阳性质控品:BTB阳性质控品的 Ct 值均应小于 35.0。

∣r∣≥0.97(correlation数值介于-0.97~-1之间,correlation数值等同于∣r∣值)。

 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效,全部试验应重新进行。

结果判定:

测定结果的计算:

如果Ct值﹤38,则实验样品的BTB DNA含量(基因拷贝数/ml)= Qty-Copies/ml;

如果38≤Ct值﹤40,为灰区建议重新检测,重新检测若38≤Ct值﹤40判为阳性,否则为阴性。

如果Ct值=40,则BTB DNA含量(基因拷贝数/ml)﹤5×10P2PCopies/ml (低于检测下限)。



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