细胞:E0771细胞
中文名称:小鼠髓样乳腺癌细胞
生长特性:贴壁
培养基:DMEM-H培养基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
冻存条件:50%基础培养基、40% FBS、10% DMSO
E0771细胞传代:
1):细胞密度约80%时,吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞(注意根据实际情况,把握消化时间)。
2):镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时;
(可用吸管吸起些许yi酶轻轻吹打细胞层某处,即可肉眼可见细胞层脱落,或吹打后镜下观察吹打处,即消化完成,否则继续消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。
3):取部分细胞悬液转移到新的培养皿中,添加适当的培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。
4):注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存。
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如果仅仅将自我更新因子去除,干细胞还是会停留在自我更新状态。只有加入了Mbd3细胞才会开始分化为特定的细胞,有助于了解小鼠胚胎干细胞和人类胚胎干细胞之间的不同。小鼠胚胎干细胞需要蛋白LIF以帮助自我更新;
(大鼠L6细胞 成肌细胞)(小鼠LA795细胞 肺腺癌细胞)
人类胚胎干细胞中不需要LIF。而Mbd3缺失的小鼠胚胎干细胞则出现像人类干细胞的现象:不需要LIF以进行自我复制。因此这种胚胎干细胞可以作为一种人类干细胞研究模式,因为它不要LIF以继续复制。
(小鼠LtK-11细胞结缔组织细胞)(兔N/N1003A细胞晶体上皮细胞)
Mbd3是重塑核小体与组蛋白去乙酰化复合物其中的一部分。此复合物起到表观沉默作用,在细胞中对基因表达进行调控;