鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）ELISA检测试剂盒说明

　　上海远慕生物详细讲述鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA检测试剂盒的相关咨讯，本司的EILSA试剂盒有进口及国产品牌供您选择，种属众多，价格实惠，提供免费代测服务，全程提供实验操作指导，种属包含大鼠，小鼠，人，鸡，兔，植物，骆驼，豚鼠，马，猴，猪，狗及其他种属等，欢迎订购!

　　【信息说明】

　　中文名：鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA试剂盒

　　中文别名：鸡N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit

　　供应商：上海远慕

　　规格：96T/48T

　　保质期：6个月，所有试剂盒均提供新批次。

　　方法：酶联免疫法/酶免法

　　种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

　　特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

　　用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

　　【样本要求】

　　1、血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

　　2、血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

　　3、尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

　　4、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

　　5、组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

　　6、标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

　　7、不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

　　【性能优点】

　　1、灵敏度高，检测时间短，只需4小时

　　2、成本低，操作简单

　　3、样本多样，血浆、尿液、细胞上清液等

　　4、检测适用于多种不同动物物种

　　5、标准范围广，允许使用高浓度样本

　　【操作步骤】

　　1、使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

　　2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

　　3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

　　4、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

　　5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

　　6、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

　　7、每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

　　8、取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

　　9、在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　【注意事项】

　　1、试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　2、实验中不用的试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

　　3、实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

　　4、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

　　5、使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

　　6、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

　　7、洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

　　8、底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

　　9、加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

　　10、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

　　【相关推荐】

　　人PL7抗体/抗苏氨酰tRNA合成酶(PL7)ELISA试剂盒

　　人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体(ANNA-1/Hu)ELISA试剂盒

　　绵羊饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒操作步骤

　　大鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒检测说明书