大鼠乙醛脱氢酶（ALDH）ELISA检测试剂盒组织结构

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大鼠乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA检测试剂盒组织结构

　　【信息说明】

　　中文名：大鼠乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒

　　别名：大鼠乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA Kit

　　供应商：上海远慕

　　规格：48t/96t

　　保存：2-8℃

　　有效期：6个月

　　特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

　　用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

　　检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。

　　常见ELISA试剂盒：白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。

　　适用范围：仅用于科研实验，禁用于临床。

　　【标本处理】

　　1、细胞培养上清液

　　根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。

　　2、脑脊液

　　根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品，然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。

　　3、血浆

　　①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分钟，4℃，分离血浆样品，然后储存在零下80℃直到使用。

　　②用试剂盒中的标准稀释液23倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测，按照说明书方法检测。

　　【操作步骤】

　　1、使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

　　2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

　　3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

　　4、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

　　5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

　　6、甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

　　7、每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

　　8、取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

　　9、在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　【组织结构】

　　1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

　　2、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

　　3、细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

　　4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。

　　5、保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应 在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

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