【植物血球凝集素PHA-P】用途_简介说明_试剂准备_注意事项

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【植物血球凝集素PHA-P】详细说明

【简介说明】

植物血球凝集素(Phytohaemagglutinin，PHA) 也称植物血凝素，为低聚糖(由D一甘露糖、氨基葡萄糖酸衍生物所构成)与蛋白质的复合物，属于高分子糖蛋白类，存在于一些豆类种子中，对红细胞有一定凝集作用故名。

【试剂准备】

1、TE: 10mM Tris-HCl (pH 7.8); 1mM EDTA (pH 8.0)。

2、TBS: 25mM Tris-HCl (pH 7.4); 200mM NaCl; 5mM KCl。

3、裂解缓冲液：250mM SDS; 使用前加入蛋白酶K至100mg/ml。

4、20% SDS

5、2mg/ml蛋白酶K

6、Tris饱和酚(pH 8.0)、酚/lv仿(酚∶lv仿=1∶1)、lv仿

7、无水乙醇、75%乙醇

【用途】

PHA是一种促细胞分裂原(mitogen)。在体外能刺激小淋细胞转化成具有免疫活性的淋细胞，并促进其分裂。转化的淋巴细胞能分泌各种淋巴因子。

1、PHA对外周周血淋巴细胞的转化作用。外周血淋巴细胞与PHA在体外一起培养，可使小淋巴细胞转化为淋巴母细胞。

2、PHA刺激淋巴细胞有丝分裂。

3、PHA能增强淋巴细胞玫瑰花环率，可用以判断机体细胞免疫功能。

4、PHA有促进腹腔巨噬细胞的吞噬作用。

5、PHA能诱导产生细胞移动抑制因子。

6、PHA能用于淋巴细胞亚太群研究。

【注意事项】

1、所有用品均需要高温高压，以灭活残余的DNA酶。

2、所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。

3、用大口滴管或吸头操作，以尽量减少打断DNA的可能性。

4、用上述方法提取的DNA纯度可以满足一般实验(如Southern 杂交、PCR等)目的。如要求更高，可参考有关资料进行DNA纯化。

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