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脱氧核糖核酸酶Ⅰ说明
脱氧核糖核酸酶Ⅰ是zui有代表性的核酸内切酶。zui早是由M.Kunitz从胰脏中分离出结晶的,也称为胰脱氧核糖核酸酶或DNaseⅠ, EC3.1.21.1。分子量约3.1万,等电点pH4.7,zui适PH 7附近,需要Mg2 和Mn2 。分离单链和双链DNA,产生具有 5′-磷酸末端的分解物。在一般条件下其分解产物含有1到8—12个寡聚核苷酸,平均大小等于四个核苷酸。反应初期似乎是先分解dpPupPy键,但因二价离子的存在对切断的方式有显著影响。因此酶容易得到结晶,所以于核酸的研究上广泛应用;又由于对整个结构已经明确,因而也是酶化学研究的材料。
脱氧核糖核酸酶Ⅰ
脱氧核糖核酸酶Ⅰ用途
用于分子生物学研究。降解DNA的各种酶。这些酶使糖-磷酸酯主链上的磷酸二酯键水解。此类酶分为两种:外切核酸酶和内切核酸酶。DNAase种类很多,有些为单链特异的,有的为双链特异性的,或序列特异性(如限制性内切酶)。限制性核酸内切酶对特定碱基序列有识别能力,此一特性已用于基因操作技术中,以构建人工克隆。
脱氧核糖核酸酶Ⅰ性状
为双链特异性内切核酸酶,能降解双链DNA成为具有5ˊ-磷酸及3ˊ-OH末端的寡脱氧核糖核苷酸。当有一价锰离子存在时,亦能降解单链DNA。溶于水,微溶于30%乙醇和丙酮。酶反应:脱氧核糖核酸→二核苷酸5′磷酸+寡聚核苷酸5′磷酸zui适pH 7.8。吸光系数(E1%280)11.1。激活剂为二价金属离子,zui大激活可以从镁(Mg2+)+钙(Ca2+)得到。抑制剂有EDTA和十二烷基硫酸钠。可加5mmol/L钙(Ca2+)
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