葡聚糖凝胶G-15保存方法

上海远慕生物详细为您介绍葡聚糖凝胶G-15性能特点，保存方法，参数说明，使用方法及其他咨讯，本司所供应的葡聚糖凝胶系列有很多，比如有：葡聚糖凝胶LH-20，葡聚糖凝胶LH-60，葡聚糖凝胶G-10，葡聚糖凝胶G-15，葡聚糖凝胶G-25，葡聚糖凝胶G-50，了解更多请来电!

中文名：葡聚糖凝胶G-15

中文别名：交联葡聚糖凝胶G-15；交联右旋糖酐凝胶G-15

英文名：Sephadex G-15

供应商：上海远慕

干颗粒直径：40～120um

PH：2～13

床体积毫升/克干分子筛：2.5～3.5ml/g

分子量分级范围：A.肽及球形蛋白质：100～1500;B. 葡聚糖(线性分子)：100～1500

性状：白色珠粒或粉末，属亲水性凝胶；性稳定，不溶于水，弱酸和碱溶液，遇强酸能使糖甘键分解。

葡聚糖凝胶G-15保存方法：

1、未使用的葡聚糖凝胶G-15，室温保存即可。

2、使用后保存方法如下：凝胶层析的载体不会与被分离的物质发生任何作用，因此凝胶柱在层析分离后稍加平衡即可进行下一次的分离操作；但使用多次后，由于床体积变小，流动速率降低或杂质污染等原因，使分离效果受到影响；此时对凝胶柱需进行再生处理，其方法是:先用水反复进行逆向冲洗，再用缓冲溶液平衡，即可进行下一次分离；对使用过的凝胶，若短时间保存，只要反复洗涤除去蛋白质等杂质，加入适量防腐剂即可。

3、若长期保存，则需将凝胶从柱中取出，进行洗涤，脱水和干燥等处理后，装瓶保存。

 葡聚糖凝胶G-15使用方法:

1、乙醇浸泡:在室温下，将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，用无盐水洗去残存的乙醇，滤干。

2、无盐水浸泡:室温下，在无盐水中充分溶胀24小时，间隙搅拌，以保证凝胶的*溶胀。

3、盐酸浸泡:在常温下再用0.2N HCl浸泡12小时，间隙搅拌，滤干，水洗至中性。

4、将溶胀好的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层。

5、上样前平衡层析柱至少3-5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。

6、凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1-2%的床体积，视分离情况可以调整；脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积，柱高的选择也与分离要求相关，柱高控制在40-50cm 以下，过高的凝胶层会引起较大的反压，应当尽可能避免；难分离物质要有一定柱高和流速控制，脱盐时高径比为5: 1 即可。

7、洗脱方法:可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以*分离纯化。

8、在位清洗(CIP)：凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白；方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向清洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。

葡聚糖凝胶G-15说明：

葡聚糖凝胶G-15吸水率是1mL/g干胶，G型交联葡聚糖凝胶，该凝胶是由直链的葡聚糖分子和交联剂3-氯1,2-环氧丙烷(交联剂)相互交联而成的具有多孔网状结构的高分子化合物；凝胶颗粒中网孔的大小可通过调节葡聚糖和交联剂的比例来控制，交联度越大，网孔结构越紧密;交联度越小，网孔结构就越疏松，网孔的大小决定了被分离物质能够自由出入凝胶内部的分子量范围；可分离的分子量范围从几百到几十万不等。

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