腺苷脱氨酶（ADA）检测试剂盒（波氏比色法）检测原理

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中文名：腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒(波氏比色法)

供应商：上海远慕

规格：100T

分类：酶类检测

保存：4℃,避光,6个月

用途：定量检测血清、血浆、组织等样品中的腺苷脱氨酶活性

说明：腺苷脱氨酶催化腺嘌呤核苷水解脱氢,产生铵离子；通过分光光度计检测640nm处吸光度。

腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒(波氏比色法)

腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒(波氏比色法)检测原理：

待测样品中的ADA催化腺嘌呤核苷水解脱氨，产生次huang嘌呤核苷和铵离子，利用波氏显色法，测定氨离子生成量；其反应公式为：腺苷+H2O→次huang嘌呤+NH3；通过分光光度计检测处吸光度，根据计算公式可得ADA活力，100T试剂盒可测50个样本；该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒(波氏比色法)操作步骤：

1、准备样品：

a、血浆，血清样品：血浆，血清按照常规方法制备；可以直接用于本试剂盒的测定，冻存，用于ADA的检测。

b、细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，冻存，用于ADA的检测。

c、高活性样品：如果样品中含有较高活性的ADA，可以使用ddH2O稀释。

d、(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的ADA含量。

2、稀释标准品：用ddH2O准确稀释氨氮标准(1mg/ml)至25μg/ml，即为氨氮标准工作液，4℃保存，备用。

3、ADA检测：设置空白管，标准管，对照管，测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡；如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

4、混匀，分光光度计处检测吸光度值，比色杯光径，以ddH2O调零，读取各管吸光度值；一般应数小时内检测完毕；酶活力高于上限者，应将样品稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。

腺苷脱氨酶(ADA)检测试剂盒(波氏比色法)注意事项：

1、稀释样品和研磨样品所用水，均应为ddH2O，不可为普通的水。

2、如果采用单位，需在测得活力单位基础上乘以1.19。

3、胸水标本经离心后取上清，置于4℃保存备用，ADA活性可稳定1周。

4、血清样本应避免溶血，4℃保存3天。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

说明：

腺苷脱氨酶(Adenosine Deaminase，ADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类，属于一种巯基酶，每分子至少含2个活性巯基；ADA能催化腺嘌呤核苷转变为次huang嘌呤核苷，再经核苷磷酸化酶作用生成次huang嘌呤，其代谢缓和终产物为尿酸；ADA广泛分布于人体各组织中，以胸腺，脾和其他淋巴组织中含量zui高；而肝，肺，肾和骨胳肌等含量低。

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