Plasmid Mini Kit II（50）

质粒小量提取试剂盒II型，Plasmid Mini Kit II(50)详细介绍

美国Omega包含了多款系列的提取试剂盒及实验耗材，溶液等，包含：快速过滤超大量质粒提取试剂盒，质粒小量提取试剂盒I型，质粒大量提取试剂盒，质粒快速中量提取试剂盒，质粒快速大量提取试剂盒，酵母质粒提取试剂盒，96孔板快速过滤质粒提取试剂盒，其他系列等，作为Omega代理商，上海远慕生物秉承信誉为生存之本的宗旨，对于产品的质量上是层层把关，价格上也非常实惠，订购！

名称：质粒小量提取试剂盒II型

品牌：Omega

供应商：上海远慕

系列：质粒小量提取试剂盒

货号：D6945-01

型号：Plasmid Mini Kit II(50)

用途：从小于15ml培养过夜的菌液提取50-70ug高纯度质粒DNA

质粒小量提取试剂盒II型使用范围与技术指标：

1.适用于从菌液中提取各类高、中、低拷贝量的质粒。

2.本试剂盒可纯化长度达15kb的质粒。

3.过夜培养的菌液（一般OD600>1.5），高拷贝量质粒提取能力每毫升菌液可达4-6μg，如pUC18等；中低拷贝量质粒每毫升菌液1-3μg，如pET系列载体。

质粒小量提取试剂盒采用经典的碱裂解法和硅胶柱纯化方式，适合于从1.5-5.0ml培养过夜的大肠杆菌(DH5α, JM109)等菌液中抽提5-35µg高纯度的质粒DNA。操作者可在30分钟内完成多个样品的质粒提取工作。纯化的质粒可以直接用于自动测序、限制性内切酶酶切、PCR、标记等实验。从1.5-5.0ml培养过夜的菌液中收集细菌后，采用经典的碱裂解法裂解细菌，离心去除染色体DNA和蛋白质，上清液转移至硅胶柱，离心吸附质粒DNA，经两种溶液洗涤去除残余蛋白质和各种杂质，zui后用Elution Buffer洗脱出质粒DNA。

Plasmid Mini Kit II(50)，质粒小量提取试剂盒II型使用流程：

*次使用时，将试剂盒携带的RNaseA全部加入到溶液SI中，混合均匀，4°C保存。

1.取2ml菌液，8,000rpm离心1min，去除上清，收集菌体，倒尽或吸干培养基。（菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中，一般可多至6-10ml菌液）。

2.向留有菌体沉淀的离心管中加入150μl溶液SI(请先检查是否已加入RNaseA），吸打或振荡至*悬浮菌体。（如果菌块未*混匀，会影响质粒的得率和质量）。

3.向离心管中加入250μl溶液SⅡ，温和地颠倒离心管6-8次使菌体让其裂解。（混匀一定要温和，与之前步骤相比，此时菌液应变得清亮粘稠，作用时间不要超过5min）。

4.向离心管中加入400μl溶液SⅢ，立即颠倒离心管6-8次，充分混匀，此时会出现白色沉淀。

5.12,000rpm离心5-10min。（如果上清中还有微小白色沉淀，可再次离心后取上清）小心地将上清移入吸附柱中，室温放置2分钟，8,000rpm离心1min，倒掉收集管中的液体，将吸附柱放入同一个收集管中。（过柱后液体可进行第2次过柱，增加回收效率）。

6.向吸附柱中加入700μl洗涤液WB(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，8,000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。

7.向吸附柱中加入500μl洗涤液WB，8,000rpm离心1min，弃废液。

8.12,000rpm离心2min，将吸附柱敞口置于室温2-3分钟，目的是去除吸附柱中残余的洗涤液WB。

9.将吸附柱放入一个干净的1.5ml收集管中，向吸附膜中央加入100-150μl EB(将EB预热至60℃可以进一步提高得率），室温放置2min，12,000rpm离心1min。(为了增加质粒的回收效率，可将收集液 EB分两次洗脱，每次50μl加入吸附柱中，效率明显有提升)。

质粒小量提取试剂盒部分相关产品如下：

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