上海远慕生物是家专业从事科研试剂的供应商,详细为您介绍小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒用途,特点,品牌,操作说明书,注意事项,样本要求等资讯,专业代理供应进口/国产ELISA试剂盒,质粒载体,动物血清血浆,标准品对照品,化学试剂,培养基,抗体,缓冲液,生化试剂,实验耗材,其他试剂等,ELISA种属包含:植物,马,牛,兔,鸡,大鼠,小鼠,人,豚鼠,犬,猪,羊及其他动物,提供免费代测服务,订购!
中文名:小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒
别名:小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA kit
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保质期:6个月,所有试剂盒均提供批次。
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好。
小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
适用范围:用于科研方面,不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。
ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中SOD含量。
小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒标本的采集及保存:
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃ 后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA检测试剂盒液体类标本:
包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
1)血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/ 分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5)组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA检测试剂盒说明:
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列数据在小试管中进行稀释。
20nmol/L 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
10nmol/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
5nmol/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
2.5nmol/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.25nmol/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒用途注意事项:
1.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
2.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
3.保用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物a、b液时,避免使用带金属部分的加样器。
4.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
5.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
6.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
7.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
8.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
9.底物a应挥发,避免长时间打开盖子。底物b对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取od值。
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