人H1N1神经氨酸酶抑制剂(NAIs)Elisa试剂盒操作步骤
1.
标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
240pg/ml
5 号标准品
150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
120pg/ml
4 号标准品
150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
60pg/ml
3 号标准品
150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
30pg/ml
2 号标准品
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
15pg/ml
1 号标准品
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2.
加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，
然后再加待测样品 10µl（样品zui终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.
温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.
配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6.
加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.
温育：操作同 3。
8.
洗涤：操作同 5。
9.
显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
人H1N1神经氨酸酶抑制剂(NAIs)Elisa试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人 H1N1 神经氨酸酶抑制剂 (NAIs)水平。用纯
化的人 H1N1 神经氨酸酶抑制剂 (NAIs)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微
孔中依次加入 H1N1 神经氨酸酶抑制剂 (NAIs)，再与 HRP 标记的 H1N1 神经氨酸酶抑制剂
(NAIs)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB
在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中
的 H1N1 神经氨酸酶抑制剂 (NAIs)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD
值），通过标准曲线计算样品中人 H1N1 神经氨酸酶抑制剂 (NAIs)浓度。
：021 60340850 021 60340830 021 60340820
客服 ：372584443 1091953152 827774711
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