甲酰胺,PCR 级5mL说明书产品介绍:
甲酰胺,PCR 级5mL说明书产品及特点:
本试剂盒提供合成 cDNA *链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全长 cDNA 拷贝。
1. 使用突变的反转录酶,内源 RNase H 活性低。
2. zui长可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、随机引物和 RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提 供)。
4. 总 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作为模板。
5. 可用于 cDNA 文库构建、RT-PCR、探针标记等。
合成建文库用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反应体系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或专一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 样品不能含有基因组 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板专一性引物 100 pmol 注意:随机引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均长度成反比。 RNase-free 水 补水到 13 uL 2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保温 5 分钟。对富含二级结构的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 温 5 分钟。如果使用随机引物,则改成 25℃ 5 分钟)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然 后再转移到 42℃保温 60 分钟)。此步为 RT 反应。
7. 70℃保温 10 分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二链 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反应体系:
对照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或随机引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或对照引物 2 uL
RNase-free 水 补水到 13 uL
2. 70℃保温 5 分钟后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含标记 dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温 5 分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆转录酶(含 RI),反应终体积为 20uL。
6. 42℃保温 60 分钟(但如果使用随机引物,需要先 25℃保温 10 分钟,然后再转移到 42℃保温 60 分钟)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 电泳检测。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 总量的 50%以上,电泳一般能出现 1.1Kb 的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。
直链淀粉 TMRE
可溶性淀粉 TSQ(6- 甲氧基 -(8-p- 甲苯磺酰胺 ) 喹啉
卵清蛋白 Tubulin-Tracker Red( 微管红色荧光探针 )
胶原蛋白Ⅰ型 Zinquin 乙酯
细胞色素 C 1400W(iNOS 抑制剂 )
鲑鱼精 DNA 5-Fluorouracil(5- 脲嘧啶 )
弗氏*佐剂 Ac-DEVD-FMK(Caspase3Inhibitor)
γ- 球蛋白 ( 牛血 ) Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)
牛血红蛋白 Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)
昆布多糖 Actinomycin D( 基因转录抑制剂 )
植物血球凝集素 M AG490(JAK 抑制剂 )
植物血球凝集素 P AICAR(AMPK 激活剂 )
牛甲状腺素蛋白 BAY11-7082(NF-κB 抑制剂 )
玉米蛋白 Brefeldin A( 蛋白转运抑制剂 )
L(-)岩藻糖
〖英文名称〗:L(-)Fucose;6-Deoxy-L-galactose
〖其他名称〗:L-岩藻糖;6-脱氧-L-半乳糖;墨角澡糖;L-夫糖;L-去氧水解乳糖;L-脱氧半乳糖
〖CAS号〗:2438-80-4
C6H12O5=164.16
〖级别〗:试剂级
纯度:≥99.0%
水分:≤2.0%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:白色结晶粉末。六碳糖的一种,可以看做是一种甲基戊糖。自然界存在的岩藻糖绝大多数为L-岩藻糖,D构型的岩藻糖仅作为稀有糖,发现于一些糖甘类化合物中。L-岩藻糖较大量地存在于海藻及树胶中,也发现于某些细菌的多糖中。
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗
〖保存〗:RT
岩藻多糖
〖英文名称〗:Fucoidin;Fucoidan from Fucus vesiculosus;Fucoidan;Sulfated algal polysaccharide
〖其他名称〗:岩藻聚糖硫酸酯;岩藻定
〖CAS号〗:9072-19-9
分子式:(C6H10O7S