以下是鼻疽伯克霍尔德氏菌PCR检测试剂盒的订购信息:
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
4-硝基氯苯 100-00-5
4-硝基苯胺 100-01-6
4-硝基苯酚 100-02-7
恶霉灵 10004-44-1
对甲氧基苯乙酮 100-06-1
3-氨基-5-苯基噻吩-2-甲酸甲酯 100063-22-7
对甲氧基苯甲酰氯 100-07-2
对甲氧基苯甲酸 100-09-4
对硝基溴化苄 100-11-8
3-乙氧基丙烯酸乙酯 1001-26-9
1-(氯甲基)-4-硝基苯 100-14-1
N-甲基对硝基 100-15-2
N-乙酰基乙二胺 1001-53-2
4-硝基苯肼 100-16-3
对硝基苯乙酮 100-19-6
对苯二甲酸 100-21-0
二氯化二硫 10025-67-9
氯化亚锡 10025-69-1
六水三氯化铁 10025-77-1
氯化铟 10025-82-8
三氯化锑 10025-91-9
四氯化硅 10026-04-7
氯化锆 10026-11-6
10026-13-8
硫酸铁 10028-22-5
环戊胺 1003-03-8
四氢噻吩-3-酮 1003-04-9
4-乙氧基基吡唑 10031-82-0
2-吡咯甲醛 1003-29-8
5-噻唑甲醛 1003-32-3
鼻疽伯克霍尔德氏菌PCR检测试剂盒高氯酸镁 10034-81-8
基化氢 10034-85-2
硫酸氢钠 10034-88-5
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。