Matrigel 基底膜基质,Matrigel基质会有色差变化(淡黄色到深红色),是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的,但是与5%CO2平衡后色差即会减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行,试剂瓶瓶盖可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。
操作指南:
BD采用技术,从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中分离出BD Matrigel 基底膜基质,其主要成分由层粘连蛋白,Ⅳ型胶原,巢蛋白,硫酸肝素糖蛋白等组成,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。BD Matrigel基底膜基质在室温条件下,聚合形成具有生物学活性的三维基质,模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能,有利于体外细胞的培养和分化,以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。
BD Matrigel 基底膜基质形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。高浓度的Matrigel适用于研究体内血管生成和肿瘤细胞迁移及肿瘤模型的建立等。
细胞可在0.5mm厚度的Matrigel基质层表面生长,也可在1mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层,可以用于细胞贴壁,但不能用于细胞的分化研究。
注意:可将冻融后的Matrigel分装在多个小管,所有分装均需用预冷的冻存管,迅速冷冻并保存,避免多次冻融。
Matrigel在22-35℃温度环境下快速成胶,因此溶解时在4℃冰上过夜冻融(4度时会随着温度的上升部分成胶)。所有用品在使用前需置于冰浴,必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作Matrigel。成胶后的Matrigel可以在4℃24-48小时后重新呈液态。
用1ml无菌水溶解后添加于100ml HB0256中 Polymyxin B 多粘菌素B 1.2mg/支*5
用于产气荚膜梭菌的培养(SN标准) Poly Peptone Yeast Extract Medium 多价蛋白胨-酵母膏 (PY) 培养基 250
加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB标准) Cooked Meat Medium Base 疱肉培养基基础 250
加入疱肉基础中,配成疱肉培养基 Dried Meat Particle 疱肉牛肉粒 100
用于肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养(GB标准) Egg Yolk Agar Base 卵黄琼脂培养基基础 250
用于产气荚膜梭菌的牛奶发酵试验 含铁牛奶培养基 250
用于干燥食品的计数和培养(MERCK方法) Differentia Clostridial Agar 梭菌鉴别琼脂(DCA) 250
用于食品和其它物质中梭菌的计数和培养(MERCK方法) Differentia Reinforced Clostridial Agar 强化梭菌鉴别琼脂(DRCA) 250
用于梭菌的分离培养(MERCK方法) Reinforced Clostridium Agar 强化梭菌琼脂 250